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銷(xiāo)售 美國(guó) Invitrogen (SuperScript® III反轉(zhuǎn)錄酶)

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北京東方安諾生化科技有限公司

應(yīng)用： 鏈 cDNA 合成、陣列標(biāo)記、cDNA 文庫(kù)、RT-PCR、引物延伸和 3´ 和 5´ RACE。

來(lái)源： 純化自表達(dá) M-MLV 的 pol 基因的大腸桿菌 (1,2)，通過(guò)突變?cè)黾恿藷岱€(wěn)定性和半衰期，降低了 RNase H 活性。

性能和質(zhì)量測(cè)試： SDS-PAGE 純度；脫氧核糖核酸內(nèi)切酶、脫氧核糖核酸外切酶和核糖核酸酶分析(圖 2)及 cDNA 產(chǎn)物的產(chǎn)量和長(zhǎng)度。

單位定義： 一個(gè)單位的 SuperScript® III RT 是在 37°C 的反應(yīng)體系中，使用 poly(A)•oligo(dT)12-18 作為模板•引物，在 10 分鐘內(nèi)將 1 納摩爾脫氧核糖核苷酸摻入酸沉淀材料所需的酶量 (3)。

單位反應(yīng)條件： 50 mM Tris-HCl (pH 8.3)、40 mM KCl、6 mM MgCl 2、1 mM DTT。 0.5 查看更多mM [ 3 H]dTTP、0.1 mM poly(A)、0.1 mM oligo(dT)12-18、0.1 mg/ml BSA 和酶，共 50 µl，溫度 37°C，時(shí)間 10 分鐘。

描述
SuperScript® III 反轉(zhuǎn)錄酶 (RT) (SuperScript® III Reverse Transcriptase (RT)) 是 SuperScript® II RT 的專(zhuān)有突變體，在 50°C 具有活性，半衰期為 220 分鐘，使用基因特異性引物 (GSP) 提高特異性，在所有 RT 中 cDNA 產(chǎn)量。 如果要進(jìn)行特定基因的 RT-PCR 或從總 RNA 或 poly (A)+ RNA 樣品生成 cDNA，該產(chǎn)品十分理想。 和 SuperScript® II 一樣，它可以從單鏈 RNA、DNA 或 RNA:DNA 雜合體合成互補(bǔ) DNA 鏈。 通過(guò)引入點(diǎn)突變對(duì) SuperScript® III RT 進(jìn)行遺傳改造，這些點(diǎn)突變可以增加半衰期、降低 RNase 活性并增加熱穩(wěn)定性。 進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾后：
50°C 時(shí)半衰期為 220 分鐘，獲得的 cDNA 產(chǎn)量(圖 1)
RNase H 活性降低，獲得更多全長(zhǎng) cDNA
在 50°C 有活性，用 GSP 增加特異性
能增加 RT 單位而不抑制后續(xù)的 PCR